产品货号：
LA10300
中文名称：
噻唑蓝
英文名称：
MTT
产品规格：
1g
发货周期：
1～3天
产品价格：
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噻唑蓝(MTT)是一种生物染料。常用于基于MTT检测方法的细胞活力、细胞增殖或细胞毒性检测。因为MTT具有正电荷，它可以穿过细胞膜并被线粒体还原形成紫色甲臜染料。溶解MTT甲臜染料需要使用有机溶剂。脱氢酶的检测，染色法。
| CAS号 | 298-93-1 |
| 分子式 | C18H16BrN5S |
| 分子量 | 414.32 |
| 外观 | 黄色或橙色固体 |
| 纯度 | ≥98% |
| 溶解性 | 5mg/ml溶于水、盐溶液、培养基；溶于甲醇、DMSO，乙醇(20mg/ml) |
| 熔点 | 195℃ |
| 干燥失重 | ＜1.0% |
| 储存条件 | 2～8℃，避光防潮密闭干燥 |
普通MTT法实验步骤(仅供参考)
其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。
- 接种细胞：用含10％胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液，以每孔1000～10000个细胞接种到96孔板，每孔体积200μL。
- 培养细胞：同一般培养条件，培养3～5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。
- 呈色：培养3～5天后，每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS配制，pH=7.4)20μL.继续孵育4h，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150μL DMSO，振荡10min，使结晶物充分融解。
- 比色：选择490nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。
MTT配制方法
通常MTT配成的终浓度为5mg/ml，须用PBS(磷酸缓冲液)或生理盐水做溶剂。(市面上一般MTT的包装为100mg,250mg或1g)
- 对于100mg这样的小包装，厂家都是将MTT放入小管中的，建议不要再用天平称量分装，而应该一次性将其全配制成溶液，如100mg用20mlPBS来溶解。
具体做法：
预先在50mL离心管(没有的话，可用培养瓶替代)加入20mL的PBS，从中先吸取500～1000μL的PBS装入含MTT的小管中，吹打若十次后将其移入50mL离心管，然后再混匀。可以重复几次以使小管中的MTT不残留于管内。将MTT完全混匀后，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，分装避光(避光袋或是黑纸、锡箔纸包住)可长期保存于-20度。按细胞培养板每孔需加10μL计算，一般每96孔板约需1mL，所以分装时可考虑每管分装1mL。 - 对于大包装，可按上述方法称取一部分溶解，也有人将粉剂分装在EP管里，用的时候现配，直接往培养板中加。
- 配制MTT时用PBS溶解，也有人用生理盐水配，60度水浴助溶。
注意：
- 在配制和保存的过程中，容器最好用铝箔纸包住。
- 配成的MTT需要无菌，MTT对菌很敏感。
- MTT一般最好现用现配，过滤后4度避光保存两周内有效，或配制成5mg/ml保存在-20℃，避免反复冻融，最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用。
- MTT有致癌性，用的时候小心，一定要带手套。有条件可以采用我司推荐的MTT试剂盒，价格合算后已经相当亲民。
5、我司产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。 - 部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。
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